构建人CD59真核表达载体并利用壳聚糖介导转染NIH3T3细胞

• 作 者: 乔庆 窦科峰 陈勇 张静 李剑平 王映梅 毛海泉
• 机 构: 第四军医大学唐都医院普通外科,第四军医大学西京医院肝胆外科,第四军医大学西京医院病理科,新加坡约翰霍普金斯大学生物医学部
• 出 处: 中国普外基础与临床杂志
• 发表日期: 2006年4期
• 关键词: CD59 壳聚糖 纳米微粒 基因克隆 基因转染 免疫组织化学 CD59 Chitosan Nanoparticle Gene clone Gene transf
• 基金项目: 国家自然科学基金（编号：30070210）

目的构建人CD59真核表达载体pSecTag2／HygroB-CD59，并利用壳聚糖（chitosan）组装成纳米微粒复合体，转染小鼠NIH3T3细胞。方法应用PCR方法，从CD59-pGEM-T Easy Vector克隆相关的DNA序列，插入到具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2／HygroB中，构建pSecTag2／HygroB-CD59真核表达质粒，并进行酶切鉴定及序列测定。利用壳聚糖包裹质粒，转染小鼠NIH3T3细胞，并用抗CD59抗体对转染细胞进行免疫组织化学染色。结果CD59基因大