多抗PVY、TMV和CMV转基因烟草的培育

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【目的】利用RNA介导抗性培育抗多种植物病毒的转基因烟草。【方法】分别以马铃薯Y病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)全长衣壳蛋白(CP)基因为模板,通过设计PCRBf物和亚克隆获得PVY CP 3’端长腰100bp、TMV CP 3’端长度100bp和CMVCP3’端长度200bp的cDNA片段并拼接成嵌合基因,并以此为模板构建反向重复结构嵌合基因的植物表达载体pRHPTC。将pRHPTC通过冻融法导入农杆菌LBA4404,呆用叶盘法转化烟草NC89,然后测定转基因烟草对3种病毒
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