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为分析马乳酒样乳杆菌ZW3（Lactobacillus kefiranofaciens ZW3，Lb. Kefiranofaciens ZW3）的一株突变株 2#（Lactobacillus kefiranofaciens ZW3-2#，2#）产糖量下降的原因。对 2#突变株进行基因组重测序 后 与 野 生 菌 ZW3 全 基 因 组 比 对 ， 分 析 突 变 基 因 在 代 谢 通 路 中 的 作 用 与 乳 酸 菌 胞 外 多 糖（exopolysaccharide，EPS）产量的相关性；利用实时荧光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR，RT-q PCR）技术分析可能会与多糖产量相关的突变基因的相对表达量；构建含有表达量变化明显基因的重组质粒转至大肠杆菌并测其酶活，探究突变基因与产糖量的关系。结果经全基因组分析比对，野生菌株 ZW3 与突变株2#在 CDS 区和启动子区发生突变的基因共 60 个，其中相关催化反应酶类有 6 个，分别为：WANG0173、WANG0174、WANG0175（3 个基因均为编码二羟丙酮激酶亚基部分）、WANG0292（β-半乳糖苷酶小亚基）、WANG0840（UDP-N-乙酰胞壁酸-L-丙氨酸：D-谷氨酸连接酶，Mur D）、WANG1108（丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，serine/threonine protein kinases，STPK），其中 WANG0292 发生了同义突变。RT-q PCR分析突变基因相对表达量，发现突变株 WANG1108 基因相对表达量下降明显，选取 WANG1108 进一步阐明与多糖产量的关系；成功构建重组表达载体 p ET28a-ZW3/2#-1108、并转至表达菌株大肠杆菌 BL21（DE3）（Escherichia coli BL21（DE3），E.coli BL21（DE3）），诱导蛋白表达，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）检测，检测酶活。酶活测定结果显示，突变株中酶活比野生菌降低了 37 %。由此推测基因 WANG1108 的突变是影响突变株产糖量下降的原因之一。