【摘 要】
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目的 探讨二妙散主要成分——来自黄柏的盐酸小檗碱与来自苍术的白术内酯Ⅲ(苍术内酯Ⅲ)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎性活化的影响.方法 使用LPS激活BV2小胶质细胞产生炎症反应建立体外BV2小胶质细胞活化模型;用噻唑蓝比色法(MTT)检测正常对照组、LPS模型组、盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组BV2小胶质细胞活性;用Western blot法检测正常对照组、LPS模型组、盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组、Resatorvid组BV2小胶质细胞的激活相关
【机 构】
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南京中医药大学附属医院,江苏 南京210029
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目的 探讨二妙散主要成分——来自黄柏的盐酸小檗碱与来自苍术的白术内酯Ⅲ(苍术内酯Ⅲ)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎性活化的影响.方法 使用LPS激活BV2小胶质细胞产生炎症反应建立体外BV2小胶质细胞活化模型;用噻唑蓝比色法(MTT)检测正常对照组、LPS模型组、盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组BV2小胶质细胞活性;用Western blot法检测正常对照组、LPS模型组、盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组、Resatorvid组BV2小胶质细胞的激活相关蛋白环氧化酶-2(COX-2)、髓样分化因子(MyD88)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达情况;分别用Griess法和免疫荧光染色法检测正常对照组、LPS模型组、盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组、Resator-vid组BV2小胶质细胞产生一氧化氮(NO)情况和核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)核转移情况.结果 盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组BV2小胶质细胞活性与正常对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05).LPS模型组BV2小胶质细胞中TNF-α、iNOS、MyD88、TLR4、COX-2蛋白表达水平及NO浓度、NF-κB p65入核率均明显高于正常对照组(P均<0.05);盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组、盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组、Resatorvid组BV2小胶质细胞中TNF-α、iNOS、MyD88、TLR4、COX-2蛋白表达水平及NO浓度、NF-κB p65入核率均明显低于LPS模型组(P均<0.05),其中盐酸小檗碱+白术内酯Ⅲ组和Resatorvid组的结果均明显低于盐酸小檗碱组、白术内酯Ⅲ组(P均<0.05).结论 二妙散主要成分可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,调节相关促炎细胞因子的表达来抑制LPS诱导的小鼠BV2小胶质细胞活化产生的炎症反应,且盐酸小檗碱与白术内酯Ⅲ两种单体共同使用较单独使用效果更佳.
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