【摘 要】
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目的构建钙网织蛋白/黑素瘤抗原基因-A3（CRT/MAGE-A3）双基因重组腺病毒载体,并进行体外表达研究。方法从表达质粒pcDNA3/CRT中切取目的片段CRT,定向克隆至穿梭载体pShuttle-GFP
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所
【基金项目】
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基金项目：辽宁省自然科学基金资助项目（20042073）
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目的构建钙网织蛋白/黑素瘤抗原基因-A3（CRT/MAGE-A3）双基因重组腺病毒载体,并进行体外表达研究。方法从表达质粒pcDNA3/CRT中切取目的片段CRT,定向克隆至穿梭载体pShuttle-GFP-CMV。根据Genbank中提供的黑素瘤基因序列,设计并合成引物,以人肺癌组织cDNA文库为模板采用RT-PCR技术扩增人黑素瘤抗原基因-A3基因片段,测序后将黑素瘤抗原基因-A3基因片段定向克隆至穿梭载体,进而将穿梭载体克隆至PacⅠ限制性内切酶线性化的腺病毒载体pAdxsi。结果目的片段CRT转入
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