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目的:克隆东亚钳蝎钙通道样毒素(BmCa)基因,并构建原核表达质粒,在大肠杆菌中重组表达该毒素蛋白。方法:以东亚钳蝎尾毒腺的总RNA为模板,通过RT—PCR技术,扩增并克隆BmCa的cDNA基因,并将该基因重组到PET—GST表达载体中,转化入大肠杆菌B121并诱导表达,采用Ni—SuperChelating Resin柱亲和层析纯化,用小白鼠毒性实验检测融合蛋白的活性。结果:成功克隆BmCa基因并构建原核表达质粒,IPTG诱导后表达分子质量约为33KD的融合蛋白,含量为大肠杆菌总蛋白的25%,经亲和层析