探讨pH值降低对大鼠心肌细胞活力的影响并分析其可能机制。
方法取新生SD大鼠5只，分离心脏培养原代心肌细胞，进行以下实验。(1)取原代心肌细胞，按照随机数字表法分为pH值7.4＋6 h组、pH值7.0＋6 h组、pH值6.5＋6 h组、pH值6.0＋6 h组、pH值6.5＋1 h组和pH值6.5＋3 h组，每组4孔。pH值7.4＋6 h组、pH值7.0＋6 h组、pH值6.5＋6 h组、pH值6.0＋6 h组细胞常规培养48 h后(下同)分别更换pH值为7.4、7.0、6.5、6.0的DMEM-F12(下同)培养基，培养6 h；pH值6.5＋1 h组、pH值6.5＋3 h组细胞更换pH值为6.5的培养基，分别培养1、3 h。噻唑蓝法检测细胞活力。(2)取原代心肌细胞，按照随机数字表法分为pH值7.4组、pH值6.5组和pH值6.5＋紫杉醇组，每组2孔。pH值7.4组细胞更换pH值为7.4培养基，pH值6.5组和pH值6.5＋紫杉醇组细胞更换pH值为6.5培养基，pH值6.5＋紫杉醇组细胞另加入终物质的量浓度为0.2 μmol/L紫杉醇，培养6 h。免疫荧光法检测细胞微管形态及密度。(3)取原代心肌细胞，同实验(2)分组处理，每组2孔，蛋白质印迹法检测细胞聚合态和游离态微管蛋白表达。(4)取原代心肌细胞，同实验(2)分组处理，每组4孔，噻唑蓝法检测紫杉醇处理后细胞活力。对数据行单因素方差分析、LSD-t检验。
结果(1)pH值7.4＋6 h组、pH值7.0＋6 h组、pH值6.5＋6 h组、pH值6.0＋6 h组、pH值6.5＋1 h组、pH值6.5＋3 h组细胞活力分别为1.00±0.08、0.90±0.08、0.85±0.06、0.83±0.04、0.91±0.10、0.89±0.10。与pH值7.4＋6 h组比较，pH值7.0＋6 h组、pH值6.5＋6 h组、pH值6.0＋6 h组、pH值6.5＋1 h组、pH值6.5＋3 h组细胞活力均有不同程度下降(t＝2.476、4.002、4.996、2.168、2.400，P<0.05)。(2)pH值7.4组细胞微管围绕细胞核呈放射状分布，管状结构清晰；与pH值7.4组比较，pH值6.5组细胞微管骨架破坏明显，表现为管状结构中断、破碎，微管密度降低；pH值6.5＋紫杉醇组细胞微管破坏程度较pH值6.5组明显减轻，微管结构基本恢复正常。(3)与pH值7.4组比较，pH值6.5组细胞游离态微管蛋白表达量明显增加(t＝3.030，P<0.05)，聚合态微管蛋白表达量明显减少(t＝8.604，P<0.05)；与pH值6.5组比较，pH值6.5＋紫杉醇组细胞游离态微管蛋白表达量明显减少(t＝4.559，P<0.05)，聚合态微管蛋白表达量明显增加(t＝5.472，P<0.05)。(4)pH值7.4组、pH值6.5组、pH值6.5＋紫杉醇组细胞活力分别为1.00±0.10、0.83±0.04、0.93±0.10。pH值6.5组细胞活力较pH值7.4组明显降低(t＝4.412，P<0.05)，pH值6.5＋紫杉醇组细胞活力较pH值6.5组明显升高(t＝2.461，P<0.05)。
结论pH值降低通过破坏微管骨架引起大鼠心肌细胞活力下降，稳定微管骨架后可明显减轻酸性处理所致损害，改善心肌细胞活力。