【摘 要】
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目的 研究核糖体蛋白侧柄亚单位P0(ribosomal protein lateral stalk subunit P0,RPLP0)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的调控作用.方法 用qRT-PCR和Western blot检测健康者(n=15)和AML患者(n=30)骨髓标本、AML细胞系(THP-1)及PBMC细胞中RPLP0的表达.用Lipofectamine 2000分别将RPLP0的短发夹RNA(shRNA-RPLP0组)、shRNA阴性对照(shRNA-NC组)、过表达RPLP0的质
【机 构】
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西安交通大学第一附属医院血液内科,西安 710061
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目的 研究核糖体蛋白侧柄亚单位P0(ribosomal protein lateral stalk subunit P0,RPLP0)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的调控作用.方法 用qRT-PCR和Western blot检测健康者(n=15)和AML患者(n=30)骨髓标本、AML细胞系(THP-1)及PBMC细胞中RPLP0的表达.用Lipofectamine 2000分别将RPLP0的短发夹RNA(shRNA-RPLP0组)、shRNA阴性对照(shRNA-NC组)、过表达RPLP0的质粒(pcDNA3.1-RPLP0组)以及对照质粒(pcDNA3.1-NC组)转染到THP-1细胞中,MTT法测定细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,qRT-PCR和Western blot检测细胞中p53、PTEN、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT的表达.结果 与健康者相比,AML患者骨髓中RPLP0的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.001).与PBMC相比,THP-1细胞中RPLP0的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.001).与shRNA-NC组相比,shRNA-RPLP0组的相对细胞活力降低(P<0.001),而细胞凋亡率升高(P<0.001).与shRNA-NC组相比,shRNA-RPLP0组的p53和PTEN蛋白表达量显著升高,而p-PI3K和p-AKT蛋白表达量显著降低(P<0.05).与pcDNA3.1-NC组相比,pcDNA3.1-RPLP0组相对细胞活力升高(P<0.05),p53和PTEN蛋白表达量降低(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量升高(P<0.05).结论 下调RPLP0的表达可抑制AML细胞的增殖并诱导凋亡,RPLP0对AML细胞增殖和凋亡的影响是通过p53-PTEN-PI3K-AKT轴介导的.
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