补体C3基因敲除对四氯化碳致小鼠肝损伤及纤维化的作用

• 作 者: 董昆 郭振亚 于京京 陈世连 董淳强 袁观斗 何松青
• 机 构: 广西医科大学第一附属医院器官移植科，南宁 530021,广西医科大学第一附属医院肝胆外科，南宁 530021,广西医科大学第一附属医院肝胆外科，南宁 530021,广西医科大学第一附属医院肝胆外科，南
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2021年38期
• 关键词: 肝损伤 凋亡 肝纤维化 补体C3 四氯化碳

目的

观察补体C3基因敲除对四氯化碳(CCl₄)诱导的小鼠肝损伤及肝纤维化的影响。

方法

通过腹腔注射CCl₄对野生小鼠及C3基因敲除鼠进行造模，实验组每周腹腔注射两次2%CCl₄玉米油溶液，每次5 ml/kg，对照组给予相同频率及剂量的玉米油溶液腹腔注射。实验使用随机数字表法将小鼠随机分为4组：野生小鼠对照组(WT-sham)，C3基因敲除鼠对照组(C3^-/--sham)，野生小鼠实验组(WT-CCl₄)，C3基因敲除鼠实验组(C3^-/--CCl₄)。造模4周后处死小鼠，收取其肝组织及血清样本，通过肝功能检测、原位缺口末端标记法(TUNEL)荧光染色、免疫组织化学、定量聚合酶链反应(PCR)等实验方法对样本进行检测，分析各组之间肝损伤、细胞凋亡、肝纤维化、炎症水平等指标的差异。两组之间差异性统计用双尾t检验进行分析。

结果

WT-CCl₄组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)显著高于C3^-/--CCl₄组[ALT：(53.5±3.7) U/L比(32.8±3.1) U/L，P<0.01；AST：(170.3±16.2) U/L比(123.3±7.1) U/L，P<0.05]。同时，WT-CCl₄组细胞凋亡水平、氧化应激相关产物髓过氧化物酶(MPO)、3-氯酪氨酸水平显著高于C3^-/--CCl₄组(细胞凋亡：30.0±3.0比17.0±2.6，P<0.05；MPO：3.3±0.2比1.8±0.3，P<0.01；3-氯酪氨酸：3.8±0.8比1.7±0.3，P<0.01)。WT-CCl₄组肝组织天狼星红染色水平、Ⅰ型胶原及平滑肌肌动蛋白生成水平显著高于C3^-/--CCl₄组(天狼星红染色：4.3±0.3比2.0±0.5，P<0.05；Ⅰ型胶原：4.7±0.7比2.3±0.3，P<0.05；平滑肌肌动蛋白：4.6±0.6比2.3±0.3，P<0.05)。WT-CCl₄组肝组织肿瘤坏死因子、白细胞介素(IL)-6及IL-1的RNA表达水平与巨噬细胞浸润水平显著高于C3^-/--CCl₄组(肿瘤坏死因子：4.2±0.6比2.3±0.3，P<0.05；IL-6：3.0±0.3比1.6±0.2，P<0.01；IL-1：3.2±0.1比2.0±0.3，P<0.05；巨噬细胞浸润水平：5.3±0.6比2.6±0.7，P<0.05)。

结论

C3基因敲除可显著减轻CCl₄诱导的小鼠肝损伤及肝纤维化水平。