从普通野生稻硅胶干燥的小量叶片中制备DNA用于RAPD分析和总DNA库的建立(英文)

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普通野生稻( Oryzarufipogon Griff.)的基因资源对水稻的育种起着至关重要的作用。报道了从其硅胶干燥的小量叶片中制备DNA的方法。用此方法制备的DNA分子量大(40~45 kb) ,产率也较高(50 ~200 μg/g) ,且成功地进行了RAPD扩增。用制备的44 个居群,1168 个个体的总DNA 建立了中国普通野生稻的总DNA 库作长期冷冻保存,可用于基于PCR 的DNA水平上的各种目的的研究。根据实验结果,从在室温下贮存1 周、3 个月、6 个月、1 年的硅胶干燥的叶片中提取的DNA 用于RAPD扩增所得的扩增产物没有差异;模板DNA浓度在3 .1 ~50 ng 的范围内均得到很好的RAPD扩增结果。这说明了从硅胶干燥的叶片中提取的普通野生稻的DNA 用于RAPD扩增的产物很稳定,将其用于群体遗传分析具有很好的可比性和可靠性。同时也讨论了模板DNA的纯度和浓度对RAPD扩增的影响 The genetic resources of Oryzarufipogon Griff. Play a crucial role in the breeding of rice. A method of preparing DNA from a small amount of dried silica gel leaves is reported. The DNA prepared by this method has high molecular weight (40-45 kb) and high yield (50-200 μg / g), and RAPD amplification has been successfully carried out. The total DNA of 44 Chinese populations and 1168 individuals was used to establish a long-term cryopreservation of the common DNA library of O. japonicus, which can be used for various purposes based on the DNA level of PCR. According to the results of the experiment, DNA extracted from the dried silica gel leaves stored at room temperature for 1 week, 3 months, 6 months and 1 year did not differ from the amplification products obtained by RAPD amplification; the template DNA concentration was 3. A good RAPD amplification result was obtained in the range of 1 to 50 ng. This shows that the DNA extracted from common wild rice from the dried leaves of silica gel is very stable for RAPD amplification and has good comparability and reliability for population genetic analysis. The effect of template DNA purity and concentration on RAPD amplification was also discussed
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