肿瘤坏死因子-α对人喉鳞癌细胞放疗增敏作用的实验研究

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目的探讨人肿瘤坏死因子α(TNF-α)对放射抗拒性人喉鳞癌细胞增殖、凋亡的影响及对其放射抗拒性的逆转作用。方法(1)利用MTT法检测TNF-α对人喉鳞癌放射抗拒性细胞系Hep-2R增殖的影响;(2)TUNEL法和流式细胞仪检测TNF-α对Hep-2R细胞凋亡的影响;(3)RT-PCR法测定TNF-α处理、TNF-α联合放疗处理Hep-2R后,细胞凋亡相关基因BaxαmRNA的表达水平;(4)克隆形成实验检测TNF-α对Hep-2R细胞放射敏感性的逆转作用;(5)移植瘤实验检测TNF-α对Hep-2R细胞放射敏感性的逆转。结果(1)TNF-α对人喉鳞癌放射抗拒性细胞系Hep-2R的生长增殖具有明显的抑制作用,且具有浓度依赖性,其中400u/mL为理想药物浓度。(2)TUNEL结果显示:TNF-α处理后,Hep-2R细胞凋亡率明显增加;流式细胞分析显示:对照组、TNF-α处理组和TNF-α联合放疗处理组Hep-2R细胞的凋亡率分别为10%,30%和55%,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR检测结果表明,TNF-α处理组和TNF-α联合放疗处理组Hep-2R细胞的Baxα基因表达均较对照组细胞明显上调。(4)克隆形成实验结果显示:对照组、TNF-α处理组、放疗组和TNF-α联合放疗处理组细胞的克隆形成率分别为100%,(80±3)%,(58±2)%和(39±2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)裸鼠移植瘤实验结果显示:TNF-α处理组,放疗组和TNF-α联合放疗处理组细胞抑瘤率分别为(15.2±1.9)%,(35.4±2.1)%和(55.1±2.9)%,三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论TNF-α可能通过抑制人喉癌细胞增殖,促进细胞凋亡,从而起到有效的放疗增敏作用。
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