【摘 要】
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目的 构建人坍塌反应调节蛋白1(CRMP-1)基因表达载体,以研究CRMP-1蛋白在目的细胞中的生物学功能.方法 从购买的人胚肾细胞株293T中提取总RNA,经过RT-PCR方法扩增含人CRMP-1
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院妇产科,中国人民解放军沈阳军区总医院肝胆外科
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目的 构建人坍塌反应调节蛋白1(CRMP-1)基因表达载体,以研究CRMP-1蛋白在目的细胞中的生物学功能.方法 从购买的人胚肾细胞株293T中提取总RNA,经过RT-PCR方法扩增含人CRMP-1基因的全长cDNA,将CRMP-1基因开放阅读框(ORF)cDNA序列,克隆到真核表达载体p3x-FLAG-myc-CMV-24中,构建真核表达质粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24.以酶切和基因序列测定方法鉴定重组质粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24的正确性.结果 酶切鉴定和基因序列测定均证实重组质粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24构建正确.结论 成功构建人CRMP-1基因真核表达载体.
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