【摘 要】
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目的 探讨RAS相关细胞生长抑制因子(DIRAS1)基因启动子区在胰腺癌中的甲基化情况及其表达调控机制.方法 应用RT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)技术探索和验证8个胰腺癌细胞系中DIRAS1基因的表达与启动子区的甲基化情况的关系.应用MSP技术检测DIRAS1基因在胰腺癌组织中的表达情况.采用 χ2检验分析DIRAS1甲基化率与胰腺癌患病相关因素的关系.结果 DIRAS1基因在Panc1、Miapaca2细胞中高表达,MSP结果表明其启动子区域呈非甲基化状态;在Panc3.11、T3m4细胞中表
【机 构】
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中国人民解放军医学院,北京 100853;中国人民解放军总医院第一医学中心消化内科医学部;中国人民解放军总医院第一医学中心消化内科医学部;新乡医学院生命科学技术学院
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目的 探讨RAS相关细胞生长抑制因子(DIRAS1)基因启动子区在胰腺癌中的甲基化情况及其表达调控机制.方法 应用RT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)技术探索和验证8个胰腺癌细胞系中DIRAS1基因的表达与启动子区的甲基化情况的关系.应用MSP技术检测DIRAS1基因在胰腺癌组织中的表达情况.采用 χ2检验分析DIRAS1甲基化率与胰腺癌患病相关因素的关系.结果 DIRAS1基因在Panc1、Miapaca2细胞中高表达,MSP结果表明其启动子区域呈非甲基化状态;在Panc3.11、T3m4细胞中表达下调,其启动子区呈部分甲基化状态;在Sw1990、Panc10.05、Bxpc3和Aspc1细胞中DIRAS1表达缺失,其启动子区呈完全甲基化.这些结果表明,DIRAS1基因启动子区域甲基化与其表达水平密切相关.应用去甲基化药物5-aza-dc处理这些细胞系后发现,非甲基化的细胞(Panc1、Miapaca2)中DIRAS1表达水平无改变,部分甲基化的细胞(Panc3.11、T3m4)中其表达水平升高,完全甲基化的细胞(Sw1990、Panc10.05、Bxpc3、Aspc1)中恢复其表达,结果表明DIRAS1的表达受启动子区甲基化调控.在原发性胰腺癌组织中,DIRAS1的甲基化率为51.8％(43/83),DIRAS1甲基化与肿瘤的分化程度相关(P=0.01),而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、神经侵犯、淋巴结转移、吸烟、饮酒等因素无关(P均>0.05).结论 DIRAS1在胰腺癌中频繁发生甲基化,其表达受启动子区甲基化调节.DIRAS1甲基化是胰腺癌预后不良的标志.
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