绵羊iPS细胞诱导及转录组学分析

• 作 者: 张译元 郭延华 王聪慧 唐红 南海艳 王立民 周平
• 机 构: 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,陕西西安市阎良区动物疾病预防控制中心
• 出 处: 新疆农业科学
• 发表日期: 2018年11期
• 关键词: 绵羊 诱导性多能干细胞(iPSCs) 重编程 转录组测序 ovis aries induced pluripotent stem cells(iPSCs) re
• 基金项目: 国家转基因重大专项“高产超细毛转基因羊新品种培育”(2016ZX08008001),兵团基础研究项目(2015AG018),兵团基础研究项目(2015AG011),新疆农垦科学院青年科学基金(YQJ201502).

【目的】建立绵羊(Ovisaries)诱导性多能干细胞系,为绵羊转基因育种、应用绵羊诱导性多能干细胞奠定基础。【方法】利用电转将OCT4、SOX2、KLF4、l-Myc、Lin28转染至绵羊成纤维细胞中并诱导培养至有光滑隆起、边缘整齐的细胞克隆,形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色以及实时荧光定量PCR检测克隆细胞的生物学特性;利用高通量测序技术对诱导0、10、20、30d的阳性细胞的差异表达基因进行筛选。【结果】克隆细胞中SOX2、OCT4、SSEA-1蛋白免疫荧光染色均呈阳性;OCT4、SOX