例析酵母菌计数方法与其种群密度调查方法的区别

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  【摘 要】本文从学生解题中对酵母菌的计数方法和酵母菌的种群密度调查方法存在的疑惑出发,对人教版高中生物必修三中提到的酵母菌种群密度的调查方法和选修一中微生物的计数方法进行解释,以便学生理解应用。
  【关键词】酵母菌;计数方法;种群密度;调查方法
  【中图分类号】G633.91 【文献标识码】A
  【文章编号】2095-3089(2018)21-0070-01
  一、题目
  在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”的实验中:
  (1)采用的方法对酵母菌进行计数。
  学生1的答案:显微镜直接计数
  学生2的答案:血球(血细胞)计数板计数
  学生3的答案:抽样检测
  參考答案:抽样检测
  学生的疑惑:参考答案只给了抽样检测一个答案,此问难道答显微镜直接计数和血球(血细胞)计数板计数是错误的吗?
  经了解,学生有此疑惑的原因是,他们在平时练习中做过以下题目:
  例1.下列有关实验叙述,正确的是( )
  A.探究培养液中酵母菌种群数量的变化,可采用抽样检测的方法对酵母菌计数
  B.模拟探究细胞大小与物质运输关系,正方体琼脂块的体积是无关变量
  C.探究植物生长调节剂对扦插枝条生根作用,插条生根数是因变量
  D.探究光照强弱对光合作用强度影响,小圆形叶片表面的气泡数是因变量
  答案:A
  例2.(多选)要达到下列各项研究目的,所采用的研究方法正确的是( )
  A.种群的数量变化——抽样调查法
  B.有丝分裂中染色体的变化规律——对比实验法
  C.酵母菌的种群密度——抽样检测法和显微直接计数法
  D.土壤小动物丰富度统计——记名计算法或目测估计法
  答案:CD
  例3.下列有关实验的叙述,不正确的是( )
  A.在观察洋葱细胞有丝分裂实验中,解离的目的是使组织中的细胞相互分离
  B.在绿叶中色素的提取实验中,研磨绿叶时应加入一些有机溶剂,如无水乙醇等
  C.进行酵母菌计数时,可采用抽样检测的方法,利用血球计数板进行计数
  D.检测梨汁中是否含有葡萄糖,可加入适量斐林试剂,摇匀后观察颜色变化
  答案:D
  人教版高中生物教材中有两处涉及到微生物数量的计数,一处是必修三中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”,运用抽样检测法,在显微镜下观察统计血球计数板上酵母菌数量并推算出培养液中酵母菌的个体数[2];另一处是选修一中“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”,介绍了三种微生物的计数方法,分别是显微镜直接计数法、稀释涂布平板法和滤膜法[1]。学生通过练习,再结合教材自行总结:酵母菌的种群密度的调查方法有抽样检测法、显微镜直接计数法,酵母菌的计数方法有抽样检测法、显微镜直接计数法、血球(血细胞)计数板计数法、稀释涂布平板法。所以该题就出现如学生1和学生2的答案。
  二、辨析
  1.显微镜直接计数法。
  显微镜直接计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板(也叫做血细胞计数板),一般细菌则采用彼得罗夫.霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板,两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清[3]。由此笔者认为微生物的计数方法,如果计数的微生物是菌体较大的酵母菌或霉菌孢子,则抽样检测法,显微镜直接计数法和血球计数板计数法是等同的。
  2.抽样检测法。
  调查玻璃容器中酵母菌数量应该使用血细胞计数板对培养液进行抽样检测的方法,来调查酵母菌的种群数量变化,通过取多次调查的平均值进行估算,而不能准确计数。利用血细胞计数板进行抽样检测的方法用到像调查植物种群数量变化的样方法,但不等同于样方法。
  抽样检测法调查酵母菌种群密度的具体操作:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。
  三、结论
  抽样检测法对酵母菌进行计数时,要用到显微镜和血球计数板。由此笔者认为抽样检测法、显微镜直接计数法、血球(血细胞)计数板计数法的原理相似,所以这三种方法是等同的。也就是说酵母菌的计数方法有抽样检测法、显微镜直接计数法、血球(血细胞)计数板计数法,而酵母菌的种群密度的调查必须对其进行计数,故酵母菌的种群密度的调查方法和计数方法是一致的。所以该题学生1、学生2、学生3的答案都是正确的。
  参考文献
  [1]朱正威,孙万儒,赵占良主编.普通高中课程标准实验教科书生物选修一生物技术实践[M].北京:人民教育出版社,2016:21.
  [2]朱正威,孙万儒主编.普通高中课程标准实验教科书生物必修三稳态与环境[M].北京:人民教育出版社,2013:68.
  [3]韩翠翠.“题说”2015年高考题中的微生物计数法[J].生物学教学,2016,44(1):47.
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