组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)新型突变体克隆载体的构建

• 作 者: 周红 王国力 黄培堂 黄翠芬
• 机 构: 第三军医大学附属西南医院烧伤研究所!重庆400038,北京军事医学科学院八所三室!北京100071,北京军事医学科学院八所三室!北京100071,北京军事医学科学院八所三室!北京100071
• 出 处: 第三军医大学学报
• 发表日期: 2000年04期
• 关键词: t-PA 重叠延伸 克隆载体 突变体 质粒 PCR重叠延伸法 测序 引物 片段 信号肽

目的构建含有K10Q、R30I、S165W及K10Q/R30I/S165W4种t PA突变体。方法采用PCR重叠延伸法进行突变体的构建。结果成功地构建了上述4种t PA突变体克隆质粒 ,测序结果表明构建完全正确。结论PCR重叠延伸法为构建突变体的可靠快捷的方法。

Objective To construct t PA mutants containing K10Q, R30I, S165W and K10Q / R30I / S165W. Methods The mutant was constructed by PCR overlap extension method. Results The cloning plasmids of the four t PA mutants were successfully constructed and the sequencing results showed that the construction was correct. Conclusion PCR overlap extension method is a reliable and efficient method to construct mutants.