幽门螺杆菌GGT基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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目的:克隆幽门螺杆菌(H pylori)γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)基因,实现GGT基因在大肠杆菌中的表达.方法:从胃癌患者胃黏膜组织中分离培养获得H pylori,提取其基因组DNA,对GGT基因进行PCR扩增,克隆进pMD18-T载体,酶切和测序验证,构建原核表达载体pET-28a(+)-GGT,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,SDS—PAGE及Western blot分析检测表达产物.结果:成功克隆了GGT基因,经酶切和测序验证
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