【摘 要】
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【目的】小立碗藓具有遗传背景清楚、活体观察方便、生活史短、再生能力强等特点,是研究发育的理想模式植物。【方法】应用0.5%的崩溃酶将生长7 d的原丝体酶解,得到新鲜原生
【机 构】
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北京农学院植物科学技术学院,北京农学院生物科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然基金面上项目(31371243)
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【目的】小立碗藓具有遗传背景清楚、活体观察方便、生活史短、再生能力强等特点,是研究发育的理想模式植物。【方法】应用0.5%的崩溃酶将生长7 d的原丝体酶解,得到新鲜原生质体,先过滤再用8%的甘露醇洗涤,在含有为8%的甘露醇的BCDA液体培养基内培养2 d和4 d。采用新鲜原生质体、再生2 d和再生4d的原生质体作材料,使用透射电镜,观察不同时期原生质体的细胞壁再生过程,并运用实时荧光定量PCR技术分析了细胞壁再生相关基因的表达。【结果】研究结果表明,原生质体培养2 d后开始有微纤丝发生,在原生质体培养4 d时形成细胞壁结构,细胞开始进行分裂。分析细胞壁再生相关基因的表达量,发现在新鲜原生质体中基因表达量最低,原生质体培养2 d和培养4 d后,基因表达量均比在新鲜原生质体中的表达量高。【结论】小立碗藓原生质体在液体培养基中培养2 d微纤丝发生;原生质体培养4 d形成完整的细胞壁结构。
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