免疫亲和柱-高效液相法测定牛奶中呕吐毒素

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建立一种快速、高效测定牛奶中的呕吐毒素的免疫亲和柱-高效液相方法。样品前处理采用乙腈溶剂沉淀蛋白,用PBS缓冲液淋洗,乙腈洗脱后,洗脱液在40℃下氮吹干后,流动相复溶后检测。采用Waters RP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈-水(90∶10)作为流动相,用二极管阵列检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,呕吐毒素在0.2μg/m L~2.0μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数r2为0.999 8,检出限为0.12 mg/kg,定量限为0.40 mg/kg,加标回收率达到82.2%~98.5%。
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