AMPK激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸对U937细胞增殖、分化和凋亡的影响

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目的 探讨单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)对急性单核细胞白血病细胞系U937细胞增殖、分化和凋亡的影响,并分析其可能的作用机制.方法 用不同浓度AICAR处理U937细胞24、48 h,用CCK-8法绘制细胞增殖曲线;以细胞形态学、AnnexinⅤ/7-氨基放线菌素D(7-AAD)双标记等分析细胞凋亡情况;用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b表达.用实时定量PCR检测Bcl-xL、Bax、Bim、caspase-3 mRNA表达的变化.结果 AICAR对U937细胞增殖具有显著抑制作用,且作用呈时间和剂量依赖性,24、48 h的半数抑制浓度(IC50)值分别为1.1和0.9 mmol/L.1.0 mmol/L AICAR作用U937细胞24 h,流式细胞术检测结果显示CD11b阳性细胞率无明显变化(P>0.05),但细胞形态学出现典型的凋亡特征;AnnexinⅤ/7-AAD标记的阳性细胞升高,细胞凋亡率为(6.81±1.16)%,高于对照组的(2.74±0.32)%(P<0.05).1.0 mmol/L AICAR诱导U937细胞凋亡过程中Bcl-xL、Bax表达无明显变化,Bim、caspase-3表达显著增加(P<0.05).结论 AICAR能有效抑制U937细胞增殖及促进细胞凋亡,但对U937细胞向髓系分化无明显影响,其促凋亡机制与上调Bim与caspase-3基因表达有关。

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