【摘 要】
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目的 :克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法 :RT -PCR扩增Survivin编码序列 ,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒 ,转染哺乳动物细胞 ,利用GFP绿色荧光
【机 构】
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重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,Molecular
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目的 :克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法 :RT -PCR扩增Survivin编码序列 ,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒 ,转染哺乳动物细胞 ,利用GFP绿色荧光和WesternBlot检测Survivin蛋白的表达。结果 :RT -PCR扩增出 4 2 1bp的Survivin编码序列 ,构建融合重组质粒pEGFP -C1-Survivin ,利用GFP荧光和WesternBlot证实Sur vivin蛋白的表达。结论 :成功克隆Survivin基因并在真核细胞中表达。
OBJECTIVE: To clone Survivin coding sequence and express it in eukaryotic cells. Methods: The coding sequence of Survivin was amplified by RT-PCR. The recombinant plasmid co-expressing with green fluorescent protein (GFP) was constructed and transfected into mammalian cells. The expression of Survivin protein was detected by GFP green fluorescence and Western Blot. RESULTS: A 4 2 1bp coding sequence of Survivin was amplified by RT-PCR. The recombinant plasmid pEGFP-C1-Survivin was constructed and the Survivin protein expression was confirmed by GFP fluorescence and Western Blot. Conclusion: Survivin gene was successfully cloned and expressed in eukaryotic cells.
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