【摘 要】
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目的 弱酸洗脱提取小鼠红白血病细胞膜表面肿瘤抗原肽 ,用于致敏树突状细胞(dendriticcells,DC) ,观察其对细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的体内外激活效应。方法 以pH3 3的枸橼
【机 构】
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目的 弱酸洗脱提取小鼠红白血病细胞膜表面肿瘤抗原肽 ,用于致敏树突状细胞(dendriticcells,DC) ,观察其对细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的体内外激活效应。方法 以pH3 3的枸橼酸 磷酸盐缓冲液室温下处理FBL 3小鼠红白血病细胞 5min,流式细胞术检测洗脱效率 ;弱酸洗脱的抗原肽经SepPakC18柱提取纯化 ,用于致敏DC ,检测其体外刺激CTL细胞株增殖的能力及体内激发特异性抗肿瘤免疫应答的能力。结果 弱酸可以洗脱肿瘤细胞膜表面绝大部分与MHCⅠ类分子结合的抗原肽 ;经此抗原肽致敏的DC ,体外可以激发特异性识别FBL 3细胞抗原九肽CCLCLTVFL的CD8+CTL细胞株增殖 ,回输小鼠 ,可以诱导体内生成高水平的特异性CTL活性 ,使小鼠获得抵抗后继FBL 3细胞攻击的免疫保护能力 ,并显著高于肿瘤冻融抗原致敏的DC回输组。结论 弱酸可以有效洗脱肿瘤细胞表面的Ⅰ类抗原肽 ,该类多肽致敏的DC ,在体内外均可激活CTL ,有效地诱导特异性抗肿瘤免疫功能
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