截短的弓形虫P30基因在E.coli中的高效表达及纯化条件的探索

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目的构建能在E.coli中高效表达的弓形虫主要表面抗原(P30)基因的重组表达质粒,并对纯化条件进行优化。方法 对已知的弓形虫P30基因序列进行部分取舍,用PCR技术从弓形虫ZS1株的基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段,插入载体pET-30(a)中,转化大肠杆菌DH5 α,IPTG诱导表达,包涵体经洗涤、变性、复性及不同程度的浓缩后,进行SDSPAGE及免疫印迹分析。结果从弓形虫ZS1株基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段,成功构建重组表达质粒pETP30;SDS-PAGE显示蛋白表达带的分子
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