细胞穿透肽TAT融合小鼠nNOS1-133重组蛋白的表达纯化及药效学研究

• 作 者: 朱珠 张宇 朱东亚
• 机 构: 南京医科大学药学院
• 出 处: 药学与临床研究
• 发表日期: 2014年1期
• 关键词: TAT-nNOS1-133 分离纯化 脑卒中 重组蛋白 TAT-nNOS1-133 Purification Stroke Recombinant protei
• 基金项目: 江苏省高校自然科学研究项目（11KJB180007）

目的：表达、纯化有活性的TAT-nNOS1-133重组蛋白,并初步验证其神经保护作用;为开发新神经保护药物提供理论基础.方法：通过PCR、酶切和酶连的方法构建pET28a-TAT-nNOS1-133重组质粒,并转化入大肠杆菌中表达.表达产物经洗涤、复性、阴离子交换柱（DEAE-52）、超滤纯化并除盐.通过FITC标记目的蛋白评价其能否进入细胞,并通过检测细胞凋亡评价TAT-nNOS1-133对谷氨酸诱导的兴奋性毒性的保护作用.结果：获得了较高纯度的TAT-nNOS1-133重组蛋白,经SDS-PAGE电泳