【摘 要】
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目的探讨狗肾细胞培养影响因素,优化狗肾细胞培养条件。方法将狗肾细胞以1×104的密度接种到96孔板上,改变狗肾细胞的培养条件:不同的温度(35℃、36℃、37℃)、不同的培养基(
【机 构】
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陕西省疾病预防控制中心病毒室; 渭南市疾病预防控制中心; 宝鸡市疾病预防控制中心;
【基金项目】
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“十二五”国家科技重大专项(2013ZX10004202-001-002)
论文部分内容阅读
目的探讨狗肾细胞培养影响因素,优化狗肾细胞培养条件。方法将狗肾细胞以1×104的密度接种到96孔板上,改变狗肾细胞的培养条件:不同的温度(35℃、36℃、37℃)、不同的培养基(MEM、DMEM、1640)、不同p H值(p H=6.4、6.7、7.0、7.2、7.5)、不同浓度的牛血清(0%、2.5%、5%、10%、15%)、不同浓度的L-谷氨酰胺(0、1、2、4 mmol/L)、不同浓度的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(0、50、100、150 mmol/L)、不同浓度的CO2(0%、5%),每日观察细胞形态变化,并在24、48、72、96、120、144 h加入CCK-8测450 mm下的OD值,用OD值的倍数绘制MDCK细胞的增长曲线,比较不同生长条件对MDCK细胞增殖的影响。结果狗肾细胞的最优培养条件为:37℃、5%浓度的CO2、DMEM培养基、p H值6.7~7.2、5%~10%胎牛血清、4 mmol/L-谷氨酰胺、50~100 mmol/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸。结论可以根据工作需要,调节牛血清浓度和温度高低,来加速或减慢MDCK细胞的增殖速度。
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