构建eat-2/cpl-1&Plgg-1gfp∶∶lgg-1双突变体线虫

• 作 者: 聂先奇 鲍斌
• 机 构: 合肥工业大学食品与生物工程学院
• 出 处: 合肥工业大学学报:自然科学版
• 发表日期: 2019年12期
• 关键词: 秀丽隐杆线虫 自噬 组织蛋白酶L 杂交 Caenorhabditis elegansautophagycathepsin Lcross
• 基金项目: 国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31401204)

LGG-1是线虫中与哺乳动物LC3-Ⅰ同源的蛋白,eat-2是限制性饮食突变体,cpl-1编码组织蛋白酶L,主要表达在溶酶体中参与降解蛋白质。为了研究三者之间关系,文章构建了eat-2&Plgg-1gfp∶∶lgg-1、cpl-1&Plgg-1gfp∶∶lgg-1双突变体。通过Plgg-1gfp∶∶lgg-1雄虫与eat-2/cpl-1雌雄同体杂交,在F3代中,通过绿色荧光和基因测序等方法来筛选出纯合的双突变体。最后分别检测双突变体中组织蛋白酶L及咽部收缩速率的变化。