纳豆激酶基因在E．coli HB101中的初步表达研究

• 作 者: 罗立新 黄志立 等
• 机 构: 华南理工大学食品与生物工程学院
• 出 处: 微生物学通报
• 发表日期: 2002年3期
• 关键词: 纳豆激酶 E.coliHB101 基因克隆 表达 质粒稳定性 Nattokinase gene Cloning Expression Plasmid stabi
• 基金项目: 广东省自然科学基金资助项目 (No. 980 5 4 0 )

利用PCR技术以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因，将该基因克隆到温度诱导型表达形体pVB220上，转化E．coliHB101，获得转豆激酶基因重组菌。在确定了其最佳培养时间与诱导时间后，SDS－PAGE分析结果表明基因表达产物为分泌型，蛋白表达量占菌体蛋白的12％左右，液体发酵后纳豆激酶产量可达120U／ml菌液，对重组菌中重组质粒的稳定性进行研究，结果表明该质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性，而结构稳定性较差。