【摘 要】
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目的 探讨miR?200c活化的肝星状细胞(HSC)对肝细胞癌(HCC)的促进作用.方法 用慢病毒转染的方法构建过表达miR?200c的HSC稳定株(LX2?200c)以及空质粒稳定株(LX2?nc);用MTT实验
【机 构】
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中山大学附属第一医院肝外科,广东 广州,510080
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目的 探讨miR?200c活化的肝星状细胞(HSC)对肝细胞癌(HCC)的促进作用.方法 用慢病毒转染的方法构建过表达miR?200c的HSC稳定株(LX2?200c)以及空质粒稳定株(LX2?nc);用MTT实验检测细胞增殖能力的变化,用transwell小室检测迁移和侵袭能力的影响;用裸鼠皮下种植瘤观察肝星状细胞对肝癌细胞株(HepG2和Hep3B)成瘤的影响;用Western blot方法检测HepG2和Hep3B内上皮间质转化(EMT)的标记物Zeb?1、N?cadherin和Vemintin的表达;用免疫组化方法检测皮下种植瘤组织内肝星状细胞活化标志物(α?SMA)、肿瘤组织增殖状态标志物(Ki67)的表达水平.结果 过表达miR?200c的HSC细胞株(LX2?200c)的条件培养基与对照组(LX2?nc)的条件培养基相比,可显著促进HCC体外增殖(P<0.05)、迁移及侵袭.LX2?200c可促进肝癌细胞皮下成瘤的重量和体积(P<0.05),并促进种植瘤组织中Ki67及α?SMA表达显著增加.LX2?200c条件培养基作用后的肝癌细胞株上Zeb?1、N?cadherin和Vemintin的表达增加.结论 miR?200c活化的肝星状细胞可显著促进肝癌细胞生长、侵袭.
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