【摘 要】
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目的 研究石榴汁含样血清对肝癌细胞JHH-7凋亡与迁移的影响,并探讨其可能的机制.方法 雄性SD大鼠随机分为石榴汁组(灌胃石榴汁20 mL/(kg·bw))和空白组(灌胃等量生理盐水),连续灌胃7 d,2次/d.末次灌胃后腹主动脉采血,离心获得含样和空白血清,分别干预肝癌细胞JHH-7,并以胎牛血清作为对照.MTT法检测细胞活性,计算细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡情况,Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3、Cy
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院,四川成都610041
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目的 研究石榴汁含样血清对肝癌细胞JHH-7凋亡与迁移的影响,并探讨其可能的机制.方法 雄性SD大鼠随机分为石榴汁组(灌胃石榴汁20 mL/(kg·bw))和空白组(灌胃等量生理盐水),连续灌胃7 d,2次/d.末次灌胃后腹主动脉采血,离心获得含样和空白血清,分别干预肝癌细胞JHH-7,并以胎牛血清作为对照.MTT法检测细胞活性,计算细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡情况,Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3、Cytochrome-c(Cyt-C)和 Caspase-9以及迁移相关蛋白 MMP2、MMP9和 TIMP2的表达;划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 与空白血清相比,含样血清可抑制JHH-7细胞的增殖,具有时间依赖性,且空白血清和含样血清对人正常肝细胞L02未表现出抑制作用;与空白血清相比,含样血清干预JHH-7细胞后,细胞凋亡率显著增加(P＜0.05),激活了 Bcl-2家族蛋白,进一步导致线粒体损伤,诱发了线粒体途径诱导的细胞凋亡,相关蛋白p53、Caspase-3、Cyt-C和Caspase-9表达上调,Bcl-2的表达下调,Bax/Bcl-2比值增加(P＜0.05);与空白血清相比,含样血清抑制了 JHH-7细胞的迁移,且相关蛋白MMP2和MMP9的表达下调,TIMP2的表达上调,TIMP2/MMP2比值增加(P＜0.05).结论 石榴汁含样血清通过线粒体途经诱导肝癌细胞JHH-7的凋亡,并且通过调节MMP2/TIMP2和MMP9表达的平衡抑制JHH-7的迁移,从而发挥抗肝癌作用.
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