一种用少量标本快速构建老年性白内障消减cDNA文库的方法

• 作 者: 刘燕 刘新平 等
• 机 构: 第四军医大学西京医院眼科,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室
• 出 处: 生物化学与生物物理进展
• 发表日期: 2002年6期
• 关键词: 少量标本 快速构建 老年性白内障 消减cDNA文库 改良消减杂交法 选择性PCR法 inproved subtractive hybridization se
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 0 0 185 )~~

为从少量标本中获得含较多大片段的，高质量的老年性白内障消减cDNA文库，利用磁珠分离，生物素标记的改良消减杂交法获得差异cDNA，利用选择性PCR法扩增其中大片段差异cDNA，从而成功构建老年性白内障消减cDNA文库，在文库中随挑取的22个克隆中，1000bp以上的片段有7个，占31．8％，750bp以上有15个，占68．2％，所得cDNA片段较大，可以满足下一步研究需要，改良消减杂交法结合选择性PCR法可以从少量标本中快速有效地获得大片段高质量的消减cDNA文库。