小鼠外吐小体免疫原性与1型糖尿病的相关性

• 作 者: 姚伟峰 戴飏 盛慧明 黄红宇 魏云玉 韩志君
• 机 构: 214002 南京医科大学附属无锡第二医院内分泌科,美国TorreyPinesInstituteforMolecularStudies研究所,214002 南京医科大学附属无锡第二医院转化医学中心,2
• 出 处: 中华糖尿病杂志
• 发表日期: 2013年5期
• 关键词: 糖尿病 1型 外吐小体 免疫原性

目的

研究外吐小体免疫原性及其与1型糖尿病病程的相关性。

方法

采用超滤、高速离心法分离6～15周龄NOD小鼠MIN6β细胞系以及原代胰岛胶质细胞来源的外吐小体，分为对照组、外吐小体组，以Western blotting分析蛋白表达，以流式细胞术检测外吐小体刺激抗原递呈细胞后表型变化和细胞因子释放水平，掺入³[H]以检测T淋巴细胞增殖水平，酶联免疫斑点法检测脾细胞受外吐小体刺激干扰素(IFN)-γ阳性T细胞克隆数和NOD小鼠病程的相关性。组间比较采用t检验。

结果

(1)外吐小体具有典型球状囊泡结构并携带1型糖尿病自身抗原谷氨酸脱羧酶65(GAD65)蛋白；(2)外吐小体组(11.5%)较对照组(2.6%)组织相容性抗原Ⅱ和CD₈₆分子双阳性抗原递呈细胞增加；(3)外吐小体组

、

和

亚群细胞的白细胞介素6(IL-6)均高于对照组，分别为：(115.0±2.4)比(25.3±2.9) pg/ml，(64.7±3.0 )比(22.9±1.4) pg/ml，(10.7±1.2)比(6.3±0.6) pg/ml(均P<0.05)；(4)外吐小体组

、

和

亚群细胞的肿瘤坏死因子α(TNF-α)均高于对照组，分别为：(125.0±8.6)比(29.7±1.6) pg/ml，(108.0±6.7)比(16.7±2.1) pg/ml，(24.2±1.4)比(13.5±1.7) pg/ml(均P<0.01)；(5)外吐小体组CD₄阳性T细胞亚群高于阴性对照组[外吐小体10 μg/ml组：(21510±1704) cpm，1 μg/ml组：(4450±304) cpm，阴性对照组：(575±64) cpm，均P<0.01]，且IFN-γ阳性T细胞克隆数在雌性NOD小鼠随鼠龄呈递增趋势。

结论

外吐小体具有活化自身反应性T细胞功能并与1型糖尿病病程密切相关。