【摘 要】
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目的探讨miR-223对大鼠心肌细胞纤维化相关通路的保护作用及对Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1（Twist1）、转化生长因子β1受体2（TGFBR2）的表达调控。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2，以TGF-β人工诱导心肌细胞纤维化相关通路活化，分为模型组、miR-223组（转染miR-223过表达慢病毒）以及miR-223-NC组（转染miR-223-NC慢病毒），同时设立正常细胞对照
【机 构】
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大连医科大学附属第一医院心律失常一科，大连 116000,沈阳医科大学临床医疗系，沈阳 110000,大连医科大学附属第一医院老年医学科，大连 116000,
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目的探讨miR-223对大鼠心肌细胞纤维化相关通路的保护作用及对Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1（Twist1）、转化生长因子β1受体2（TGFBR2）的表达调控。
方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2，以TGF-β人工诱导心肌细胞纤维化相关通路活化，分为模型组、miR-223组（转染miR-223过表达慢病毒）以及miR-223-NC组（转染miR-223-NC慢病毒），同时设立正常细胞对照组。免疫组化检测α-SMA的表达情况；实时荧光定量PCR（real-time PCR）测定心肌细胞miR-223、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、Twist1、TGFBR2 mRNA表达水平；Western印迹法检测心肌细胞Twist1、TGFBR2、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ及α-SMA蛋白水平；双荧光素酶报告基因验证miR-223对Twist1、TGFBR2 3′UTR的靶向调控。
结果miR-223组α-SMA阳性心肌细胞平均吸光度（0.089±0.013）明显低于模型组和miR-223-NC组（0.134±0.018，0.132±0.016）；miR-223组心肌collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、Twist1、TGFBR2 mRNA表达水平与模型组及miR-223-NC组比较显著下降，且差异具有统计学意义（P<0.05）；Twist1、TGFBR2、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ及α-SMA蛋白水平较模型组及miR-223-NC组显著下降，且差异具有统计学意义（P<0.05）；Twist1、TGFBR2 3′UTR野生型双荧光素酶报告质粒与miR-223 mimics共转染293T细胞，荧光素酶活性均显著降低[（0.48±0.06，0.51±0.07）比（0.92±0.17,0.94±0.12）]。
结论miR-223可能通过下调Twist1、TGFBR2基因的表达抑制心肌细胞中纤维化相关信号通路活化。
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