腺伴随病毒载体介导帕金森病猴基因治疗的实验研究

• 作 者: 沈扬 樊东升 康德瑄 王立军
• 机 构: 100083,北京大学第三临床医院缮,100083,北京大学第三临床医院缮,100083,北京大学第三临床医院缮,100083,北京大学第三临床医院内科神经
• 出 处: 中华神经科杂志
• 发表日期: 2004年37期
• 关键词: 腺伴随病毒 帕金森病 酪氨酸羟化酶 载体介导 氨基酸脱羧酶 基因治疗 反向末端重复 注射侧 纹状体 壳核

我们在以往的研究基础上,进一步探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病灵长类模型基因治疗实验结果. 　　材料和方法:(1)腺伴随病毒(AAV)载体的制备:酪氨酸羟化酶(TH)质粒[芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)或三磷酸鸟苷环水解酶I(GCH)质粒]是AAV基因组反向末端重复序列之间依次含巨细胞病毒早期响应启动因子、人类生长激素第一内含子、人源性TH(AADC或GCH)基因、SV40多聚腺苷信号的载体质粒.以磷酸钙沉积法共转染载体质粒、辅助质粒和腺病毒基因质粒于293细胞.3 d后回收并以冻融法裂解细胞,经离心所获得上清再经过2次氯化铯(CsCl)梯度密度超离心等精制处理,最终得到AAV-TH、AAV-AADC及AAV-GCH载体。