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目的:体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA1基因,并构建真核表达质粒,方法:从接种了弓形虫RH株的小鼠腹水中收集,纯化速殖子,提取基因组DNA,据已知的GRA1基因列,设计合成一对引物,并引入EcoR I和BamH I酶切位点,应用PCR技术,从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA1基因片段,扩增目的基因片段经纯化,双酶切后,插入真核表达质粒pEGFP-N3中,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,于卡那霉素阳性LB平板上筛选阳性克隆。重组子经EcoR I和BamH I双酶切,PCR鉴定。结果:从弓形虫RH株