重组人体干细胞因子的表达、复性、纯化及其对脐带血干细胞体外扩增作用研究

• 作 者: 范洁 丁欣欣 蒋永平
• 机 构: 中国医学科学院北京协和医学院苏州方舟生物医药研发中心,苏州方舟基因药业有限公司
• 出 处: 实用临床医药杂志
• 发表日期: 2012年15期
• 关键词: 重组人体干细胞因子 原核表达 脐带血体外扩增 recombinant human stem cell factor prokaryotic expression

目的对重组人体干细胞因子（rhSCF）蛋白在脐带血干细胞体外扩增中的作用进行研究。方法通过大肠杆菌表达系统,经IPTG诱导表达获取SCF包涵体,经透析复性、纯化后获得蛋白。从脐带血中提取单核细胞（MNC）,分选其中具有CD34＋抗原表位的细胞,使用一定浓度的血小板生成素（TPO）、FLT-3配体（FL）及rhSCF组合对脐带血干细胞进行7 d体外扩增以研究rhSCF的作用。结果成功使用IPTG在大肠杆菌BL21诱导表达rhSCF,包涵体经复性及CM-Sepharose纯化获得高纯度的rhSCF。干细胞体外