【摘 要】
：
背景:周围神经损伤是一种主要由创伤等因素引起的临床常见疾病,研究表明,由骨髓间充质干细胞转分化的许旺细胞可以促进周围神经损伤的修复与重建,但其诱导方法尚未达成共识,并且细胞神经转分化的机制仍尚不明确.目的:探讨小分子化合物(毛喉素和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)诱导骨髓间充质干细胞分化为许旺细胞的可行性,以及该诱导过程与cAMP/PKA通路的相关性.方法:采用全骨髓贴壁法从1周龄SD乳鼠四肢骨骨髓中提取出原代骨髓间充质干细胞,运用细胞免疫荧光对其进行鉴定,并用CCK-8法检测各代骨髓间充质干细胞在不同培养时
【机 构】
：
荆门市第一人民医院骨科,湖北省荆门市 448000;锦州医科大学附属第一医院骨科,辽宁省锦州市 121000;锦州医科大学骨外科学研究所,辽宁省锦州市 121000;辽宁省医学组织工程重点实验室,辽宁
论文部分内容阅读
背景:周围神经损伤是一种主要由创伤等因素引起的临床常见疾病,研究表明,由骨髓间充质干细胞转分化的许旺细胞可以促进周围神经损伤的修复与重建,但其诱导方法尚未达成共识,并且细胞神经转分化的机制仍尚不明确.目的:探讨小分子化合物(毛喉素和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)诱导骨髓间充质干细胞分化为许旺细胞的可行性,以及该诱导过程与cAMP/PKA通路的相关性.方法:采用全骨髓贴壁法从1周龄SD乳鼠四肢骨骨髓中提取出原代骨髓间充质干细胞,运用细胞免疫荧光对其进行鉴定,并用CCK-8法检测各代骨髓间充质干细胞在不同培养时间点的增殖活性变化,以小分子化合物对骨髓间充质干细胞进行体外诱导分化,实验分为3组:对照组用神经生长培养基处理120 h、诱导组用神经生长培养基+毛喉素+3-异丁基-1-甲基黄嘌呤处理120 h、抑制组用神经生长培养基+毛喉素+3-异丁基-1-甲基黄嘌呤+cAMP抑制剂SQ22536处理120 h,每60 h更换1次培养基.通过细胞形态学、Western blot等技术对许旺细胞样细胞进行鉴定及相关分析,同时检测分化过程中cAMP相关蛋白的表达.结果 与结论:①细胞免疫荧光染色显示分离培养的原代细胞能够被CD44和CD90标记,CCK-8结果显示在相同培养时间点,第1-3代骨髓间充质干细胞增殖活性逐渐增加,第3-6代骨髓间充质干细胞增殖活性逐渐降低;②Western blot结果显示小分子化合物诱导后许旺细胞特异性标志物S100β、GFAP和p75以及cAMP相关蛋白p-CREB表达均明显增加(P<0.001;P<0.001;P<0.05;P<0.0001),而cAMP/PKA抑制剂SQ22536可以抑制这一效应(P<0.01;P<0.01;P<0.05;P<0.001);③结果 表明,该小分子化合物可以诱导骨髓间充质干细胞分化为许旺细胞表型,并且诱导过程中可能激活了cAMP/PKA通路.
其他文献
背景:放射治疗是脑部肿瘤的主要治疗手段之一,可显著提高临床疗效,但其对正常脑组织所产生的副反应严重影响了患者的生活质量.因此在提高脑肿瘤组织放射疗效的前提下,寻求一种能有效预防正常脑组织损伤的方式并对其机制进行研究变得尤为重要.目的:探讨海带多糖干预对小鼠放射诱导脑损伤的影响及机制.方法:选取96只SPF级雄性昆明小鼠,随机分为4组(n=24),即对照组、海带多糖组、放射组、放射+海带多糖组.放射前7 d连续给药预处理后,采用总剂量为30 Gy的60Goγ射线对小鼠脑部进行定位照射以建立放射性脑损伤模型.
背景:显微CT(Micro-CT)是一种非破坏性的3D成像技术,可以在不破坏样本的情况下清楚地了解样本的内部显微结构,其分辨率极高,空间分辨率达到1-10μm,部分先进机型甚至达0.25μm,无论是数据分析还是图像处理,Micro-CT目前都已在骨组织工程研究中被广泛应用.目的:在兔胫骨骨髓炎建模过程中,以Micro-CT作为辅助观察工具,分析兔胫骨因炎症产生的结构变化以验证骨髓炎模型是否建立成功.方法:取新西兰大白兔20只,其中5只作为对照组,其余15只建立右侧胫骨骨髓炎模型,分别在2,4,6周进行影像
背景:神经胶质纤维酸性蛋白是一个中间丝过渡表达蛋白,其表达水平是最常用的星形胶质细胞的特异性标志蛋白.中医治疗脊髓损伤历史悠久,大量研究表明针刺“督脉”“足阳明胃经”对脊髓损伤的神经再生修复具有一定作用.目的:观察电针刺激后脊髓损伤大鼠损伤部位神经胶质纤维酸性蛋白表达的变化,进一步探讨电针刺激对脊髓损伤大鼠神经再生的影响.方法:将120只SD大鼠随机分为5组,即督脉电针组、胃经电针组、混合电针组、模型对照组和假手术组,每组24只,除假手术组不进行脊髓切断外,其他各组均制备T10脊髓半横断损伤模型.每个组再
背景:浓缩生长因子与表皮生长因子是近年来被广泛研究的生物学材料,经研究证实其可通过影响细胞生物学行为,进而促进组织修复与损伤愈合.目的:探讨浓缩生长因子联合表皮生长因子对人牙龈成纤维细胞、上皮细胞、人正常黑色素细胞系正常人皮肤黑色素细胞增殖和衰老的影响.方法:①浓缩生长因子/表皮生长因子与人牙龈成纤维细胞、上皮细胞、正常人皮肤黑色素细胞体外共培养,MTT分别筛选出浓缩生长因子、表皮生长因子、浓缩生长因子+表皮生长因子的最佳作用浓度;②实验分组:人牙龈成纤维细胞对照组、50％浓缩生长因子组、10μg/L表皮
背景:研究表明咪喹莫特对病理性瘢痕具有一定的防治作用,但其作用靶点及确切机制尚未明确.目的:探索咪喹莫特作用于病理性瘢痕的靶点基因并进行验证,观察咪喹莫特对瘢痕成纤维细胞迁移能力的影响.方法:从GEO在线数据库中下载并分析数据集,整合筛选出咪喹莫特作用于瘢痕组织的靶点基因.提取瘢痕来源的成纤维细胞,采用划痕实验及Transwell实验检测咪喹莫特对细胞迁移能力的影响,免疫印迹法检测Ⅰ型胶原及作用靶点PCOLCE的蛋白表达水平.结果 与结论:①通过筛选数据集整合结果,获得2个作用靶点基因,分别为PCOLCE
背景:绝经后冠心病妇女血清雌二醇降低与心功能减退、心室重构加重有关,绝经对慢性心力衰竭病情的影响及机制尚不十分清楚.沉默信息调节因子1在心血管系统中发挥保护作用.目的:研究沉默信息调节因子1在卵巢切除加重小鼠慢性心力衰竭中的作用及机制.方法:选择野生型雌性C57BL/6J小鼠及沉默信息调节因子1基因敲除的雌性C57BL/6J小鼠进行实验.①将野生型小鼠随机分为:假手术组、主动脉缩窄组、卵巢切除+主动脉缩窄组、卵巢切除+主动脉缩窄+雌二醇组.术后第1天开始,卵巢切除+主动脉缩窄+雌二醇组大鼠按照0.2 mg
背景:由抗体介导排斥反应引起的移植肾失功目前临床尚缺乏有效的治疗手段.有研究显示肾移植患者血浆miR-4286的表达显著上调,miR-4286可靶向下调转化生长因子β的表达而激活免疫反应.目的:探讨沉默miR-4286上调滤泡调节性T细胞治疗肾移植抗体介导排斥反应的作用及机制.方法:选择贵州医科大学附属医院接受肾移植的患者,纳入20例肾移植抗体介导排斥反应患者与20例免疫耐受患者,对两组活检肾组织进行苏木精-伊红染色与C4d免疫组化染色,检测两组患者外周血淋巴细胞miR-4286 mRNA的表达与滤泡辅助
背景:骨移植是临床中骨缺损治疗的主要方法,由于自体移植及异体移植的限制,组织工程骨作为替代品变得尤为重要.理想的组织工程骨需具有良好的生物学特性,这取决于支架材料的微观结构及化学性质等因素.目的:骨组织工程支架的不同设计如何影响支架的骨传导性、骨诱导性及生物降解性3种生物学特性.方法:以“骨组织工程、骨传导性、骨诱导性、黏附、扩散、物理特性、化学特性、结构特性、生长因子、离子、生物降解性、聚合物、无机材料、金属”为中文检索词检索中国知网数据库;以“bone tissue engineering,osteo
背景:在最佳功率负荷下进行力量训练能实现骨骼肌输出功率的最大化,骨骼肌输出功率的增大能提高运动员的运动表现和大众的健康水平,备受国内外学者和体能教练的青睐.目的:确定不同力量训练手段最佳功率负荷,分析不同力量训练手段最佳功率负荷输出功率特征.方法:选择北京体育大学男性大学生运动员27名,进行半蹲起和卧推抛最大力量测试,利用九轴传感器测试受试者在10％,30％,50％,70％和90％最大力量负荷下的输出功率.结果 与结论:①半蹲起的最佳功率负荷为70％最大力量,其平均输出功率和最大输出功率均显著高于10％,
背景:天然骨形态发生蛋白2在体内无法实现缓释、持续诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,如何获得内源性骨形态发生蛋白2蛋白是目前研究的热点.目的:探讨腺病毒介导人骨形态发生蛋白2转染兔骨髓间充质干细胞的成骨分化能力及其可能机制.方法:采用腺病毒介导人骨形态发生蛋白2基因转染第3代兔骨髓间充质干细胞,转染后48 h采用qRT-PCR、Western blot检测骨髓间充质干细胞中骨形态发生蛋白2的mRNA和蛋白表达,利用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平.然后进行