人copineV蛋白多克隆抗体的制备

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youngpansy
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目的:制备兔抗人copineV多克隆抗体。方法:将copineV N端423bp(626-1048bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家免3次;用ELISA和Western印迹检测抗血清,用(NH4)2SO4沉淀法初步纯化抗体。结果:表达并纯化了copineV N端蛋白,ELISA检测表明抗血清具有高亲和性,Western印迹检测表明抗体能特异性识别内源性和过表达的copineV。结论:制
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