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摘要：以静水法测试了苯酚对斑马鱼的24小时、48小时、72小时和96小时急性毒性，结果表明：苯酚对斑马鱼的24小时、48小时、72小时和96小时 LC50值分别为47.42毫克/升、42.462 毫克/升、39.355 毫克/升和39.355 毫克/升;苯酚的安全浓度为10.216 毫克/升，属于中毒化合物。
关键词：苯酚;烷基酚;斑马鱼;急性毒性
中图分类号： X171.5 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2015.01.034
苯酚是生产某些树脂、杀菌剂、防腐剂以及药物（如阿司匹林）的重要原料。常温下微溶于水，易溶于有機溶液;有腐蚀性，毒性，接触后会使局部蛋白质变性，是我国水中优先控制的污染物。
1 材料与方法
1.1 材料
苯酚（CP， 上海试剂一厂），丙酮（CP，天津市化学制剂厂）。
试验用水为充分曝气的自来水， p小时为7.52±0.25，硬度为229.14±0.45（毫克/升，以碳酸钙计），溶解氧为6.7±0.6 毫克/升，水温控制在28±2℃。
斑马鱼体长30.28±2.74毫米。在实验室水族箱驯养一周后方可进行试验。
1.2方法
首先做预备实验以确定两种烷基酚类化合物对斑马鱼的100%致死浓度LC100和不引起死亡的最大浓度LC0。然后在预实验基础上按等对数间距设置5个实验浓度组，包括24小时 LC100和 LC0。浓度分别为：26 毫克/升、33.8 毫克/升 、43.94 毫克/升、57.12 毫克/升 、74.26 毫克/升。每个浓度点进行3个平行实验，以死亡率作为观察指标，参照改进寇氏法，计算24 小时、48小时、72小时和96小时的LC50和置信区间。
LC50 = lg-1[Xk-d （∑Pi-0.5）] （1）
式中，Xk为最高剂量对数，d为相邻浓度比值的对数，Pi为各组动物死亡率（以小数表示）。
LC5095%可信限：
95% 置信限 = lg-1（lg LC50±1.96slg LC50） （2）
slgLC50=d[（∑Pi-∑Pi2）/n]1/2 （3）
式中n为各组鱼数，d为相邻浓度比值的对数。
2 结果与讨论
2.1苯酚对斑马鱼的半数致死浓度及安全浓度
苯酚溶液中斑马鱼的死亡数据见表 1，不同时段的LC50见表2。
根据表1和表2结果，参照安全浓度的计算方法48小时 LC50×0.3（24小时 LC50/48小时 LC50）2 ，估算出苯酚的安全浓度为10.216毫克/升。
2.2 斑马鱼对苯酚的毒性反应
实验中，不同浓度组试验鱼的中毒程度不同。最高浓度组，斑马鱼刚接触到试液时均出现体色变深现象，其余较低浓度组，体色变化不明显。
最高浓度组鱼一接触到试液表现出明显的中毒症状，游速增大，冲撞，48小时内基本全部死亡。较低浓度组鱼刚接触到试液也表现出游速减慢，呼吸困难等症状，且死亡率随暴露时间增长和暴露浓度增大而增加。
2.3 结论
通过本次急性毒性实验，得出苯酚对斑马鱼的48小时 LC50为42.462 毫克/升，安全浓度为10.216毫克/升。根据国家环保局《水和废水监测分析方法》（2002） 中的相关规定对苯酚进行毒性分级。苯酚属于中等毒性。可能是由于盐度、温度、溶解氧和p小时值等理化因子的改变对酚类化合物的毒性产生了影响。因此，有必要进一步探讨不同环境因素下毒物毒性的变化，以便更接近于实际应用。
从中毒症状来看，各染毒组死亡现象集中在48小时以内，72小时后死亡率几乎没有什么变化。这表明它们可能对鱼体的蓄积毒性较小，但此结论正确与否还需进一步试验证明。
参考文献
[1]周文敏，傅德黔，孙宗光，等.水中优先控制污染物黑名单 [J].中国环境监测，1990，6（4）：1～3.
[2]李婷，周启星.水环境中氯丙嗪污染对鲫鱼和大型蚤的急性毒性效应[J].生态毒理学报，2008，3（4）： 410～415.
[3]金永才.酚类物质化学烧伤和中毒[J]. 职业卫生与应急救援，2001，19（1）：15～16.
[4]国家环境保护局《水和废水监测分析方法》编委会. 水和废水监测分析方法第四版[M].北京：中国环境科学出版社， 2002， 727～729.
作者简介：房妮，硕士，宝鸡文理学院，讲师，研究方向：环境化学与退化生态环境恢复。
关键词：苯酚;烷基酚;斑马鱼;急性毒性
中图分类号： X171.5 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2015.01.034
苯酚是生产某些树脂、杀菌剂、防腐剂以及药物（如阿司匹林）的重要原料。常温下微溶于水，易溶于有機溶液;有腐蚀性，毒性，接触后会使局部蛋白质变性，是我国水中优先控制的污染物。
1 材料与方法
1.1 材料
苯酚（CP， 上海试剂一厂），丙酮（CP，天津市化学制剂厂）。
试验用水为充分曝气的自来水， p小时为7.52±0.25，硬度为229.14±0.45（毫克/升，以碳酸钙计），溶解氧为6.7±0.6 毫克/升，水温控制在28±2℃。
斑马鱼体长30.28±2.74毫米。在实验室水族箱驯养一周后方可进行试验。
1.2方法
首先做预备实验以确定两种烷基酚类化合物对斑马鱼的100%致死浓度LC100和不引起死亡的最大浓度LC0。然后在预实验基础上按等对数间距设置5个实验浓度组，包括24小时 LC100和 LC0。浓度分别为：26 毫克/升、33.8 毫克/升 、43.94 毫克/升、57.12 毫克/升 、74.26 毫克/升。每个浓度点进行3个平行实验，以死亡率作为观察指标，参照改进寇氏法，计算24 小时、48小时、72小时和96小时的LC50和置信区间。
LC50 = lg-1[Xk-d （∑Pi-0.5）] （1）
式中，Xk为最高剂量对数，d为相邻浓度比值的对数，Pi为各组动物死亡率（以小数表示）。
LC5095%可信限：
95% 置信限 = lg-1（lg LC50±1.96slg LC50） （2）
slgLC50=d[（∑Pi-∑Pi2）/n]1/2 （3）
式中n为各组鱼数，d为相邻浓度比值的对数。
2 结果与讨论
2.1苯酚对斑马鱼的半数致死浓度及安全浓度
苯酚溶液中斑马鱼的死亡数据见表 1，不同时段的LC50见表2。
根据表1和表2结果，参照安全浓度的计算方法48小时 LC50×0.3（24小时 LC50/48小时 LC50）2 ，估算出苯酚的安全浓度为10.216毫克/升。
2.2 斑马鱼对苯酚的毒性反应
实验中，不同浓度组试验鱼的中毒程度不同。最高浓度组，斑马鱼刚接触到试液时均出现体色变深现象，其余较低浓度组，体色变化不明显。
最高浓度组鱼一接触到试液表现出明显的中毒症状，游速增大，冲撞，48小时内基本全部死亡。较低浓度组鱼刚接触到试液也表现出游速减慢，呼吸困难等症状，且死亡率随暴露时间增长和暴露浓度增大而增加。
2.3 结论
通过本次急性毒性实验，得出苯酚对斑马鱼的48小时 LC50为42.462 毫克/升，安全浓度为10.216毫克/升。根据国家环保局《水和废水监测分析方法》（2002） 中的相关规定对苯酚进行毒性分级。苯酚属于中等毒性。可能是由于盐度、温度、溶解氧和p小时值等理化因子的改变对酚类化合物的毒性产生了影响。因此，有必要进一步探讨不同环境因素下毒物毒性的变化，以便更接近于实际应用。
从中毒症状来看，各染毒组死亡现象集中在48小时以内，72小时后死亡率几乎没有什么变化。这表明它们可能对鱼体的蓄积毒性较小，但此结论正确与否还需进一步试验证明。
参考文献
[1]周文敏，傅德黔，孙宗光，等.水中优先控制污染物黑名单 [J].中国环境监测，1990，6（4）：1～3.
[2]李婷，周启星.水环境中氯丙嗪污染对鲫鱼和大型蚤的急性毒性效应[J].生态毒理学报，2008，3（4）： 410～415.
[3]金永才.酚类物质化学烧伤和中毒[J]. 职业卫生与应急救援，2001，19（1）：15～16.
[4]国家环境保护局《水和废水监测分析方法》编委会. 水和废水监测分析方法第四版[M].北京：中国环境科学出版社， 2002， 727～729.
作者简介：房妮，硕士，宝鸡文理学院，讲师，研究方向：环境化学与退化生态环境恢复。