枯草杆菌的淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达

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根据枯草杆菌(Bacillus subtilis)基因文库中的淀粉酶基因的碱基序列,设计引物.以枯草杆菌菌体DNA为模板,利用PCR扩增出分子量大约为2.3kb的淀粉酶基因片段.借助于核酸内切酶和连接酶把该基因植入到pHMSXD1质粒中,构建pHMSXD2质粒载体.通过高压电击处理把载体植入到大肠杆菌(JM10)中并成功表达.该株大肠杆菌在酶基因表达后,其淀粉酶活力达到1.037 6 U/mL(LB培养液)和1.361 0 U/mL(矿物元素培养液),分别比原始的枯草杆菌的淀粉酶活力提高了46倍和286倍
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