【摘 要】
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目的:研究G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1 (G-protein coupled receptor kinase-interacting protein 1,GIT1)是否通过Notch信号通路影响骨髓细胞向破骨细胞分化.方法:取8周龄GI
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院骨科,江苏南京,210029
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目的:研究G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1 (G-protein coupled receptor kinase-interacting protein 1,GIT1)是否通过Notch信号通路影响骨髓细胞向破骨细胞分化.方法:取8周龄GIT1野生型(GIT1+/+)和GIT1基因敲除(GIT1-/-)小鼠各8只,分离培养小鼠骨髓细胞并向破骨细胞诱导分化.分别在诱导后的4、7d,检测细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acidphosphatase,TRAP)活性.在诱导后4、7d,用real-time RT-PCR检测破骨细胞相关基因组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、降钙素受体(calcitonin receptor,CTR)和基质金属蛋白酶9(matrix matalloproteinase,MMP-9)的表达,同时检测Notch信号通路受体、配体和目的基因的表达.结果:小鼠骨髓细胞向破骨细胞诱导分化过程中,基因敲除组破骨细胞的大小、数量、密度均低于野生型组;基因敲除组破骨细胞CTSK、CTR和MMP-9的表达均明显低于野生型组,差异有统计学意义(P＜0.05);基因敲除组Notch信号通路配体Jagged1、受体Notch2和目的基因Hes1的表达明显高于野生型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:GIT1缺失可能通过上调Notch信号通路的表达来抑制骨髓细胞向破骨细胞分化.
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