【摘 要】
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采用聚乙二醇(PEG6000)在(NH4)2SO4高饱和度下沉淀夹带蛋白质富集氯过氧化物酶,再利用磷酸盐溶液复溶解共沉淀物形成的双水相萃取体系高浓度回收酶蛋白,最后再经Sephadex G100柱
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(20973114), 上海师范大学科技基金资助项目(DKL714), 上海市大学生科研创新活动计划项目(CX016)
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采用聚乙二醇(PEG6000)在(NH4)2SO4高饱和度下沉淀夹带蛋白质富集氯过氧化物酶,再利用磷酸盐溶液复溶解共沉淀物形成的双水相萃取体系高浓度回收酶蛋白,最后再经Sephadex G100柱层析纯化获得高纯度酶试样。结果显示:氯过氧化物酶与PEG共沉淀总活力回收率达85.5%,酶在优化的PEG/磷酸盐双水相系统中上下相分配系数k在0.341以下,酶活力回收率达到69.1%,纯度提高了21.57倍,柱层析可使酶纯度进一步提高到24.79倍,总回收率为37.75%。
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