【摘 要】
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为了使大肠埃希菌不耐热肠毒素（LT）的毒性丧失或减弱的同时仍保留其较强的免疫原性,通过PCR和重叠—延伸PCR扩增突变体LTK63/G192基因片段,IPTG诱导表达目的蛋白,经Western免疫
【机 构】
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新疆巴音郭楞职业技术学院,新疆兵团第二师畜牧兽医工作站,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,石河子大学动物科技学院
【基金项目】
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上海市科技兴农重点攻关项目[2005攻字（10-1）]
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为了使大肠埃希菌不耐热肠毒素（LT）的毒性丧失或减弱的同时仍保留其较强的免疫原性,通过PCR和重叠—延伸PCR扩增突变体LTK63/G192基因片段,IPTG诱导表达目的蛋白,经Western免疫印迹检测目的蛋白,在HPLC系统上纯化目的蛋白,经ADP-核酸转移酶试验及Patent-mouse毒性试验检测其酶活性与毒性,纯化的目的蛋白与鸡新城疫病毒弱毒疫苗联合一起经滴鼻免疫鸡。结果表明：制备的突变体LTK63/G192的基因片段经酶切和测序发现,所构建的表达载体pLTK63/G192阅读框架正确,且相应位
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