CD44/磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白参与骨桥蛋白调节乳腺癌生物活性的研究

• 作 者: 郭满 张浩 李伟汉 陈进宏 刘平贤 王征
• 机 构: 473009 河南，南阳市中心医院乳腺、甲状腺外科,473009 河南，南阳市中心医院乳腺、甲状腺外科,473009 河南，南阳市中心医院乳腺、甲状腺外科,200040 上海，复旦大学附属华山医院普外
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2017年34期
• 关键词: 骨桥蛋白 乳腺癌 凋亡 侵袭 迁移

目的

探讨骨桥蛋白(OPN)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学活性的影响及其作用机制。

方法

采用慢病毒介导OPN敲除技术制备OPN低表达MDA-MB-231细胞，采用划痕实验、Matrigel侵袭实验及流式细胞技术观察OPN下调后细胞侵袭、迁移和凋亡等生物学活性的变化，采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot技术研究OPN下调后CD44及磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)等信号转导分子的表达变化。

结果

划痕实验结果显示OPN表达下调后细胞迁移指数与正常MDA-MB-231细胞比较[(23.5±1.9)%比(51.2±2.7)%]明显降低，差异有统计学意义(t＝18.150，P＝0.003)；Matrigel侵袭实验结果显示OPN表达下调后细胞侵袭能力与正常MDA-MB-231细胞比较(19.4±3.5比60.5±5.9)明显降低，差异有统计学意义(t＝21.170，P＝0.002)；细胞凋亡检测结果显示OPN表达下调后细胞凋亡计数与正常MDA-MB-231细胞比较(0.36±0.04比0.04±0.01)明显升高，差异有统计学意义(t＝18.710，P＝0.003)；同时，OPN表达下调后细胞内信号转导因子CD44/PI3K/Akt/mTOR表达量较正常MDA-MB-231细胞均明显降低(0.43±0.04比1.00±0.03、0.41±0.05比1.00±0.03、0.47±0.01比1.00±0.02、0.39±0.07比1.00±0.04)，差异有统计学意义(t＝39.150、41.960、57.340、40.890，P＝0.001、0.001、0.000、0.001)。

结论

OPN表达下调可以抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭、迁移，促进细胞凋亡，其作用机制的发挥可能与CD44/PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。