【摘 要】
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目的:建立甘氨酸延伸型胃泌素胞浆膜受体结合试验,并应用该方法检测甘氨酸延伸型胃泌素受体的部分特性及其在正常结肠和人结直肠肿瘤中的表达.方法:用人结直肠肿瘤细胞株DLD-
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目的:建立甘氨酸延伸型胃泌素胞浆膜受体结合试验,并应用该方法检测甘氨酸延伸型胃泌素受体的部分特性及其在正常结肠和人结直肠肿瘤中的表达.方法:用人结直肠肿瘤细胞株DLD-1建立胞浆膜制备方法,125I标记的甘氨酸延伸型胃泌素进行受体结合试验.结果:胞浆膜受体结合试验的条件为:5～10 mg胞浆膜(离心25 000 r/min 45 min制备),37℃温育60min.正常Sprague-Dawley大鼠结肠粘膜和从结肠粘膜制备的胞浆膜有特异结合,而从完整结肠制备的胞浆膜无特异结合.胞浆膜甘氨酸延伸型胃泌素受体抑制50%结合的非标记配体浓度(IC50)为3.64μmol/L±1.93μmol/L;特异性胆囊收缩素(CCK)-A受体拮抗剂L364和特异性CCK-B受体拮抗剂L365不能拮抗该受体;非特异性受体拮抗剂氯苯酰色氨酸则能拮抗.结论:甘氨酸延伸型胃泌素受体位于正常大鼠结肠粘膜、结肠粘膜和结直肠肿瘤细胞膜上,属单结合位点、低亲和力受体,不能被特异性CCK-A或CCK-B受体拮抗剂拮抗,是一种新受体.
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