【摘 要】
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目的:克隆paired box 2(pax2)基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测其活性.方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出pax2启动子,插入荧光素酶报告基
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,沈阳农业大学,军事医学科学院附属医院
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目的:克隆paired box 2(pax2)基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测其活性.方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出pax2启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,确定所扩增的DNA序列.将重组的报告基因瞬时转染人胚胎肾293T细胞,检测pax2启动子活性.结果:测序结果显示扩增的pax2启动子序列正确;活性实验表明构建的报告基因具有启动子活性,雌激素受体α(ERα)能以剂量依赖的方式升高pax2报告基因的转录.结论:克隆了pax2启动子,为ERα共调节子的功能研究提供了重要基础.
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