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在有机溶剂系统中，以固定化脂肪酶Novozym435为催化剂，对废油脂和甲醇的酯交换反应制备生物柴油的工艺进行了研究。结果表明，该反应的最佳工艺条件是以无水乙醚为溶剂、溶剂用量为0．8mL／goil、酶用量为10％、醇油物质的量比为3．5：1、反应温度为40℃和反应时间为12h；在此工艺条件下进行反应，转酯率为92．15％。采用分三步加入甲醇的方式可减轻甲醇对酶的毒害作用。但是酶在重复使用过程中存在失活现象，重复使用9次后的反应转酯率降至了15．84％。