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期刊论文
大引物PCR定点突变方法的改进
大引物PCR定点突变方法的改进
来源 :湖北大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yjqwml
【摘 要】
:
对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始
【作 者】
:
张碧乾
邓会群
宫彩霞
杨青
彭建新
洪华珠
李爱英
【机 构】
:
华中师范大学生命科学学院,华中师范大学教育部农药与化学生物学重点实验室,上海复旦大学药学院
【出 处】
:
湖北大学学报:自然科学版
【发表日期】
:
2009年1期
【关键词】
:
改进的大引物PCR点突变
基因克隆
improved megaprimer PCR
site mutagenesis
gene cloning
【基金项目】
:
国家自然科学基金(30770036),教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20070511004),教育部留学回国人员科研启动基金资助
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对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始基因的干扰.实验结果证明利用改进后的方法进行基因点突变,可以减少操作步骤,提高突变频率.
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