【摘 要】
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目的研究血培养中异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus,hVISA)的流行性及分子生物学特点。方法采用MHA5T(含有5 μg/ml替考拉宁的MH琼脂)和菌群曲线分析法(populats profiles/area under the curve,PAP/AUC)检测hVISA,PCR
【机 构】
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郑州大学第一附属医院检验科 450052,郑州大学第一附属医院检验科 450052,郑州大学第一附属医院检验科 450052
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目的研究血培养中异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus,hVISA)的流行性及分子生物学特点。
方法采用MHA5T(含有5 μg/ml替考拉宁的MH琼脂)和菌群曲线分析法(populats profiles/area under the curve,PAP/AUC)检测hVISA,PCR方法对hVISA菌株进行SCCmec(staphylococcal cassette chromosome mec)﹑多位点序列分型(multilocus-sequence typing,MLST)﹑金黄色葡萄球菌蛋白A (Staphylococcus aureus protein A,spa)和附属基因调节子(accessory gene regulator,agr)分型检测,TritonX-100诱导自溶性检测hVISA菌株和万古霉素敏感金黄色葡萄球菌(vancomycin-sensitive Staphylococcus aureus,VSSA)菌株的自溶性差异,real-time PCR方法检测hVISA和VSSA菌株中vraR、mgrA、icaA、icaR、pbp4和agr基因的表达差异。
结果血培养中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的检出率为39.5%,136株MRSA中共检出hVISA 31株,hVISA的阳性率为22.8%, hVISA菌株的万古霉素最小抑菌浓度(MIC)主要集中在1.5 μg/ml(占54.8%)和2 μg/ml(占25.8%),而VSSA菌株万古霉素MIC主要分布在0.5 μg/ml(占46.7%)和0.75 μg/ml(占39.0%)。hVISA的主要流行克隆为ST239-SCCmecⅢ-t030-agrⅠ型,有22株,占71.0%,与VSSA相比,hVISA菌株自溶性有所下降(χ2=13.583,P=0.032)。RT-PCR结果显示与VSSA菌株相比,hVISA菌株中vraR、mgrA和icaA表达水平分别升高了1.58倍、1.53倍和1.06倍(P<0.01),而icaR、agr和pbp4基因的表达水平分别下降了0.85倍、0.61倍和1.03倍(P<0.05)。
结论hVISA的流行率高达22.8%,主要流行克隆为ST239-SCCmecⅢ-t030-agrⅠ型,应引起临床高度重视,注意抗生素的合理使用,加强院感防控,避免hVISA菌株流行克隆的传播以及VISA和万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)的产生。
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