观察携带特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1对雄激素非依赖前列腺癌细胞DU145增殖和侵袭的影响。
方法同源重组法包装溶瘤腺病毒ZD55-SATB1；转染倍数(MOI)＝10.0的病毒感染DU145细胞72 h后，反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测ZD55-SATB1对前列腺癌细胞SATB1基因的mRNA表达的影响；Western blot检测ZD55-SATB1对前列腺癌细胞SATB1蛋白表达的影响及病毒复制能力；结晶紫染色法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测ZD55-SATB1对细胞的增殖抑制和毒性作用；细胞侵袭试验检测细胞侵袭力改变。
结果成功包装病毒ZD55-SATB1；RT-PCR和Western blot结果显示：ZD55-SATB1组SATB1表达量明显减少，与对照组比较差异有统计学意义。E1A蛋白表达水平在前列腺癌细胞DU145显著高于人正常前列腺上皮细胞PZ-HPV-7，差异有统计学意义，表明ZD55-SATB1具有肿瘤靶向性；结晶紫染色示：ZD55-SATB1组DU145有明显的细胞病效应。CCK-8结果显示：细胞感染后4 d，ZD55-SATB1组细胞存活率为(31.60±3.31)%，显著低于ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)组(61.70±2.42)%(P＝ 0.025)和Ad-SATB1组(82.40±3.54)%(P＝ 0.017)，差异有统计学意义。Transwell细胞侵袭实验结果显示：ZD55-SATB1组侵袭细胞数为(61.30±17.25)个，显著低于Ad-SATB1组[(170.10±25.44)个，P＝ 0.043]，ZD55-EGFP组[(295.40±23.36)个，P＝0.013]和磷酸盐缓冲液(PBS)组[(490.50±33.36)个，P＝0.009]，与对照组比较差异有统计学意义。
结论携带SATB1基因shRNA的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1可有效沉默前列腺癌细胞DU145中SATB1基因的表达，同时有效抑制DU145细胞的增殖和侵袭。