硫化氢通过抑制坏死性凋亡对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤

• 作 者: 梁伟杰 何洁仪 张稳柱 余盛龙 陈君 宋明才 陈景福 郑东诞 廖新学
• 机 构: 广州市番禺区中心医院心血管内科,广州市番禺区心血管疾病研究所,中山大学附属第一医院黄埔院区心血管内科CCU,中山大学附属第一医院心血管内科,
• 出 处: 中国病理生理杂志
• 发表日期: 2016年03期
• 关键词: 坏死性凋亡 硫化氢 高糖 心肌细胞

目的:探讨硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）能否通过调控坏死性凋亡（necroptosis）对抗高糖（HG）引起的H9c2心肌细胞损伤。方法:应用Western blot法检测心肌细胞内能反映坏死性凋亡的RIP3蛋白和cleaved caspase-3蛋白的水平;细胞计数盒测定心肌细胞存活率;双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞的数量。结果:应用HG（35 mmol/L葡萄糖）处理H9c2心肌细胞3 h、6 h、9 h、12 h和24 h均能明显地上调RIP3蛋白的表达水平,其中24 h时RIP3蛋白水平增加最明显。400μmol/L硫氢化钠（Na HS;为H₂S的供体）预处理或坏死性凋亡的特异性阻断剂necrostatin-1（Nec-1;100μmol/L）共处理心肌细胞均能明显地抑制HG对RIP3蛋白表达的上调作用。此外,Na HS预处理或Nec-1共处理心肌细胞均显著地抑制HG引起的心肌细胞损伤,使细胞存活率升高,ROS生成及MMP丢失减少。另一方面,400μmol/L Na HS预处理心肌细胞能使凋亡细胞数量及cleaved caspase-3表达明显减少。结论:H₂S可通过抑制坏死性凋亡保护心肌细胞,对抗高糖引起的损伤。